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液相色譜的分析結(jié)果數(shù)據(jù)如何來記錄和處理
點(diǎn)擊次數(shù):1507 發(fā)布時(shí)間:2021-11-05
液相色譜儀主要的組成部件為壓泵、進(jìn)樣裝置、色譜柱、檢測(cè)器和色譜數(shù)據(jù)處理裝置。
1.壓泵
由于液相色譜所使用的色譜柱一般裝填小于10μm的固定相顆粒,故對(duì)流動(dòng)相有較大的阻力,所以對(duì)于泵的耐壓有一定的要求。除此之外,對(duì)于泵還有泵體材料耐化學(xué)腐蝕、輸出流量范圍寬、輸出流量穩(wěn)定等要求。
壓泵可以分為恒壓泵和恒流泵兩大類。
恒壓泵是指輸出恒定壓力的泵,當(dāng)系統(tǒng)阻力不變時(shí)可以保持恒定流量,但系統(tǒng)阻力發(fā)生變化時(shí),就會(huì)影響到系統(tǒng)流量穩(wěn)定,因此現(xiàn)在基本已不使用。恒流泵是指可輸出恒定體積流量的泵,又分為注射型泵和往復(fù)式柱塞泵兩類。注射型泵由于其工作過程中需停流吸液以及價(jià)格昂貴等原因,目前基本不用于液相色譜儀中。往復(fù)式柱塞泵則可以提供低脈動(dòng)的連續(xù)穩(wěn)定液流,應(yīng)用于各種商品化儀器中,并衍生出了雙柱塞往復(fù)式并聯(lián)泵、雙柱塞往復(fù)式串聯(lián)泵、雙柱塞立驅(qū)動(dòng)的往復(fù)式串聯(lián)泵等多種設(shè)計(jì)。
2.進(jìn)樣裝置
在HPLC分析中由于使用了顆粒填料和壓的流動(dòng)相,因而對(duì)樣品的進(jìn)樣方式要求提,需要使樣品在進(jìn)入色譜柱頭時(shí)地注人其上端填料的中心,形成集中的一點(diǎn),以擴(kuò)散效應(yīng)影響降到。為實(shí)現(xiàn)以上要求有兩種設(shè)計(jì):停流進(jìn)樣和六通閥進(jìn)樣,但現(xiàn)在停流進(jìn)樣技術(shù)已經(jīng)*被簡(jiǎn)單易用的六通閥進(jìn)樣方式所取代。
3.色譜柱
色譜柱一般使用內(nèi)壁拋光的直型不銹鋼管作為柱管以獲得柱效。當(dāng)使用粗內(nèi)徑短柱和細(xì)內(nèi)徑色潛柱時(shí),需要注意柱外效應(yīng)所引起的色譜峰展寬,應(yīng)該盡量縮短進(jìn)樣器至檢測(cè)器之間的連接管路,以獲得更小的柱外死體積。
HPLC色譜柱裝填的固定相,其基體材料多為多孔球形或無定形的硅膠顆粒,在壓下使用勻漿裝柱法裝填,并在色譜柱兩端使用多孔不銹鋼燒結(jié)材料的過濾片以阻擋流動(dòng)相中的微小機(jī)械雜質(zhì)進(jìn)入,并防止固定相流失。
4.檢測(cè)器
檢測(cè)器主要用于檢測(cè)經(jīng)色譜柱分離后的組分濃度變化。常用的檢測(cè)器為紫外/可見光檢測(cè)器、熒光檢測(cè)器、示差折光檢測(cè)器、蒸發(fā)光散射檢測(cè)器等。
5.色譜數(shù)據(jù)處理裝置
液相色譜的分析結(jié)果數(shù)據(jù)現(xiàn)已使用色譜數(shù)據(jù)工作站來記錄和處理。色譜工作站基于微型計(jì)算機(jī)的硬件,可以實(shí)現(xiàn)如下功能:
(1) 儀器操作參數(shù)的控制功能——色譜儀的可控參數(shù),均可預(yù)設(shè)定并保存記錄,在運(yùn)行樣品時(shí)自動(dòng)調(diào)用并傳輸至儀器。
(2) 數(shù)據(jù)采集和處理功能——可通過計(jì)算機(jī)和儀器之間的數(shù)據(jù)傳輸接口自動(dòng)采集色譜數(shù)據(jù)。并根據(jù)處理參數(shù)進(jìn)行數(shù)據(jù)處理,提供色譜圖的相關(guān)積分?jǐn)?shù)據(jù),還可以選擇不同的標(biāo)準(zhǔn)計(jì)算方式來對(duì)樣品自動(dòng)進(jìn)行計(jì)算,得到定性或定量的結(jié)果。還具有計(jì)算柱效、繪制工作曲線等其他功能。
(3) 計(jì)量認(rèn)證功能——通過工作站完成對(duì)儀器的自動(dòng)認(rèn)證程序,包括流量晶度、色譜柱控溫晶度、檢測(cè)器能量檢測(cè)等多項(xiàng)參數(shù),并提供詳細(xì)的計(jì)量報(bào)告。 .
(4) 多臺(tái)儀器的自動(dòng)控制——可以適時(shí)控制多套HPLC、系統(tǒng),并同時(shí)立進(jìn)行方法設(shè)定、樣品運(yùn)行、數(shù)據(jù)采集處理。
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